Purificação e caracterização de ¿ -galactosidases de sementes de Platymiscium pubescens Micheli
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Universidade Federal de Viçosa
Resumen
Descripción
Este trabalho objetivou foi determinar a composição bioquímica de sementes de espécies florestaise caracterizar a enzima α-galactosidase de sementes germinadas de Platymiscium pubescens. Os maiores teoresde lipídios foram determinados em sementes de Chorisia speciosa, Caesalpinia peltophoroides, Tabebuia serratifoliae Tabebuia velanedae, enquanto sementes de Enterolobium contortisiliquum, Schizolobium parahyba e Cassiagrandis apresentaram os maiores teores protéicos. A α-galactosidase catalisa a hidrólise dos oligossacarídeosde rafinose, em sementes de leguminosas, durante a germinação. A maior atividade da α-galactosidase foi detectadaem sementes de Platymiscium pubescens após 72 h de embebição. Duas formas de α-galactosidases, C1 e C2,foram purificadas de sementes germinadas de P. pubescens, usando-se fracionamento com sulfato de amônioe cromatografias de filtração em gel e de afinidade. Essas enzimas apresentaram atividade máxima em pH5,5 e a 50-55 °C. Os valores de Km ap das formas C1 e C2, para o substrato ρ-nitrofenil-α-D-galactopiranosídeo,foram de 0,54 mM e 0,78 mM, e para a rafinose, de 4,64 mM e 5,09 mM, respectivamente. Essas enzimasexibiram estabilidade térmica moderada, mantendo 70% da atividade original após 3 h de incubação a 45 °C.A atividade enzimática da C1 e C2 foi totalmente perdida na presença de CuSO4 e dodecil sulfato de sódio(SDS). Tais enzimas também hidrolisaram melibiose, rafinose e estaquiose, indicando potencial para aplicaçõesbiotecnológicas.
Palabras clave
Agrociencias