Identificação molecular de rizóbios isolados de Gliricídia sepium em solos do Semiárido.

SANTOS, S. K. C. S.; SANTOSM J. W. M. dos; SILVA, R. C. S. da; RIBEIRO, P. R. de A; MORAES, S. A. de; FERNANDES JUNIOR, P. I.

Identificação molecular de rizóbios isolados de Gliricídia sepium em solos do Semiárido.

Autores

FERNANDES JUNIOR, P. I.

Descripción

A gliricídia [Gliricidia sepium (Jacq.) Kunth ex Walp] é uma leguminosa estratégica para a alimentação dos rebanhos no Semiárido brasileiro. Apesar de apresentar elevada importância para a pecuária regional, poucas informações sobre os rizóbios associados à gliricídia já foram levantadas na região Nordeste. Atualmente, há duas estirpes de Rhizobium spp. (BR 8801 e BR 8802) recomendadas para a produção de inoculantes no Brasil, porém, estirpes locais podem ter maior adaptabilidade e eficiência simbiótica. Por este motivo, a seleção de rizóbios nativos se faz importante. Este estudo objetivou a identificação de 14 estirpes de rizóbio de gliricídia da Coleção de Micro-organismos de Interesse Agrícola da Embrapa Semiárido (CMISA) por meio do sequenciamento parcial do gene 16S rRNA. As estirpes foram crescidas em meio YMA e o DNA foi extraído utilizando-se o kit comercial (Brasília, LGC Biotecnologia). O DNA foi amplificado com iniciadores universais e purificado com o kit comercial Wizard Gel and PCR Clean up (Promega). Os produtos de PCR foram enviados para a empresa ACTGene, onde foram sequenciados na plataforma ABI 3500 (Applied Biosystems). A qualidade das sequências foi avaliada com o programa Sequence Scanner 2.0 ( Applied Biosystems) e os contigs montados usando-se as sequências forward e reverse. Todas as sequências foram comparadas com as de estirpes tipo (type strains) disponíveis no banco de dados GenBank (https://www. ncbi.nlm.nih.gov/genbank/). Das 14 estirpes, duas apresentaram sequências similares à Bosea e Brevibacillus, gêneros não rizobianos. Dentre as 12 estirpes rizobianas 11 foram classificadas como Sinorhizobium spp., com similaridade a S. alkalisoli (variando de 98,95% a 99,70% de similaridade). Uma única estirpe foi classificada como Rhizobium sp. no clado R. tropici (99,92% de similaridade com R. multihospitium). Este é o primeiro registro de Sinorhizobium spp. nodulando G. sepium na região Nordeste do Brasil.