Optimización de la transformación genética con Agrobacterium rhizogenes
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Universidad de Costa Rica
Resumen
Descripción
Para optimizar la eficiencia en la transformacióngenética con Agrobacterium rhizogenes,secciones de zanahoria fueron inoculadas con lacepa de Agrobacterium A4TC y co-cultivadascon acetosiringona, floroglucinol y una combinaciónde ambos. La acetosiringona es uno delos compuestos fenólicos que liberan los tejidosvegetales como respuesta a heridas, el cualinduce la transferencia del T-ADN de la agrobacteriaa la planta. El floroglucinol es también uncompuesto fenólico; sin embargo, ejerce un efectosinergístico con las auxinas, inhibiendo parcialmentela actividad de las citocininas. Lamayor eficiencia en la transformación (75%) seobtuvo con el uso de acetosiringona (100 mM)en combinación con floroglucinol (25 mg l-1). Engeneral, 6 días de co-cultivo, independientementede los tratamientos, fue el tiempo queindujo el mayor porcentaje de transformación. Lainclusión de 100 mg l-1 de kanamicina resultó unmecanismo eficiente para discriminar entreraíces transformadas y no transformadas. En adición,este trabajo presenta un novedoso sistemacon el cual, una vez realizada la transformación,la bacteria puede ser eliminada completamenteen 48 h con Cefotaxime en dosis de 500 mg l-1.
Palabras clave
Agrociencias