Metodología para la determinación de la adherencia in vitro de lactobacilos a las células intestinales de cerdos
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Instituto de Ciencia Animal
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Con el objetivo de establecer una metodología experimental para determinar la adherencia in vitro de los lactobacilos a las células intestinales de cerdos, mediante el método de los indicadores radioactivos, se utilizaron cerdos sanos de 10 semanas de edad para la obtención de células epiteliales vivas del intestino y cepas de Lactobacillus acidophillus (B/103-1-5, LB/12, B/103-11-3, B/103-1-2 y B/103-11-1). Se determinó la dinámica de supervivencia de estas células y se desarrolló un estudio de gradiente de centrifugación, desde 6000 hasta 600 rpm, para establecer la velocidad a la que se pueden separar los lactobacilos libres de las células somáticas. Se estandarizó un ensayo radioquímico para la determinación indirecta de la adherencia en el sobrenadante. Se obtuvieron niveles adecuados de supervivencia durante 6 h en buffer fosfato a pH= 7.2 y 4 °C y se logró una separación efectiva a 600 rpm. La adherencia de las cepas fue de 37,1.3, 0.2, 0.1 y 0.6 % para la B/103-1-5, LB/12, B/103-11-3, B/103-1-2, y B/103-11-1, respectivamente. Como resultado se estableció el protocolo experimental completo para determinar la adherencia in vitro de los lactobacilos a las células intestinales de cerdos.
Palabras clave
Agrociencias