Actividad Ribonucleasa en el Látex de Calotropis procera (Aiton)W.T. Aiton y Pedilanthus tithymaloides (L.)
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Universidad Nacional de Colombia
Resumen
Descripción
Las enzimas ribonucleasas (RNasas) han sido utilizadas con efectividad en el tratamiento de ciertos tipos de cáncer y pueden tener otras propiedades aplicables en biotecnología. Con el objetivo de identificar la presencia de actividad RNasa en el látex de las plantas tropicales C alotropis procera y Pedilanthus tithymaloides se colectaron muestras a partir de plantas adultas ubicadas al norte del estado Aragua, Venezuela. Las proteínas solubles fueron extraídas con acetato de sodio 50 mM pH 5 (16 μL/μg de látex) y eliminada la porción poliisoprenoide por centrifugación a 16.000 x g durante 15 min. La actividad RNasa se estimó utilizando una técnica que incluye la aplicación de alícuotas de la mezcla de reacción sobre geles de poliacrilamida-urea y separadas por electroforesis. La degradación del sustrato fue cuantificada por densitometría. Se probaron diversos sustratos (ARNt total , ARNt phe y ARNm transcrito in vitro a partir de ADN plasmídico). El látex de ambas especies presentó actividad RNasa, con actividades específicas iniciales de 1,42 ± 0,74 μg de ARN hidrolizado/min/ μg de proteína; 0,45 ± 0,18 ng de ARN hidrolizado/min/ng de proteína y 0,28 ± 0,07 ng de ARN hidrolizado/min/ng de proteína para el ARNt total , ARNm transcrito y ARNt phe , respectivamente, en C. procera , y de 0,02 ± 0,001 ng de ARN hidrolizado/min/ng de proteína para el ARNm transcrito y ARNt phe en P. tithymaloides . Este constituye el primer reporte acerca de la presencia de enzimas RNasas en el látex de estas especies.
Palabras clave
Agrociencias