Localização subcelular de proteínas baseada em co-localização com marcadores celulares.
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- Uma informação importante para a análise funcional de proteínas é a sua localização subcelular, e uma das técnicas mais utilizadas para esse fim é a expressão de uma proteína cuja localização deseja-se estabelecer, simultaneamente a uma ou mais proteínas de localização conhecida fusionadas a proteínas fluorescentes marcadoras. A expressão deste tipo de fusão traducional, em uma célula vegetal, pode ser observada por microscopia de fluorescência. O objetivo do presente trabalho é implementar a utilização de proteínas conhecidas como marcadoras de organelas para estudos de localização subcelular na Embrapa Milho e Sorgo. Para isso, células da epiderme de Nicotiana bentanthamiana foram infiltradas com culturas de Agrobacterium tumefaciens GV3101 contendo um vetor binário que continha, individualmente, cada proteína marcadora fusionada a uma proteína fluorescente. A transformação transiente de Nicotiana bentanthamiana usando a estirpe da bactéria GV3101 mostrou-se eficiente para estudos de localização subcelular das proteínas. Pelos perfis de localização obtidos, considera-se que o conjunto de marcadores de organelas utilizado neste estudo é adequado para estudos de localização subcelular de proteínas de plantas.
Palabras clave
Transformação transiente, Marcador Molecular, Melhoramento Genético Vegetal, Gene, Nicotiana benthamiana
