Padronização de PCR Multiplex para detecção direta e diferenciação de espécies de Campylobacter em Queijo Minas Artesanal.

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dc.contributorPEDRO PAULO ARCANJO LIMA, UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA
dc.contributorBIANCA OLIVEIRA HOSKEN, UNIVERSIDADE FEERAL DE VIÇOSA
dc.contributorAMANDA GONELLI GONÇALVES, UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA
dc.contributorPAULA APARECIDA AZEVEDO ALMEIDA, UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA
dc.contributorJOAO BATISTA RIBEIRO, CNPGL
dc.contributorHUMBERTO MOREIRA HUNGARO, UNIVERSIDADE FEDERAL DE JUIZ DE FORA
dc.contributorMARCIO ROBERTO SILVA, CNPGL.
dc.creatorLIMA, P. P. A.
dc.creatorHOSKEN, B. O.
dc.creatorGONÇALVES, A. G.
dc.creatorALMEIDA, P. A. A.
dc.creatorRIBEIRO, J. B.
dc.creatorHUNGARO, H. M.
dc.creatorSILVA, M. R.
dc.date2019-03-14T19:51:31Z
dc.date2019-03-14T19:51:31Z
dc.date2019-03-14
dc.date2019
dc.date2019-07-04T11:11:11Z
dc.date.accessioned2026-07-07T03:47:23Z
dc.descriptionResumo: O Queijo Minas Artesanal (QMA) é um potencial carreador de patógenos zoonóticos. Campylobacter spp. tem sido o patógeno mais frequentemente associado a surtos de doenças de origem alimentar no mundo. A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é uma ferramenta promissora para uma detecção rápida e direta de Campylobacter nos alimentos. O objetivo deste estudo foi desenvolver um método molecular baseado em PCR multiplex para identificação direta de Campylobacter em QMA. No primeiro ensaio de PCR, as amostras foram artificialmente contaminadas com um mix igual de C. jejuni (CAMP 492) e C. coli (CAMP 1004) para ajustar as condições da PCR (>108 UFC/g) para estabelecer o limite de detecção. O DNA dessas amostras foi extraído pelo método que utiliza fenol/clorofórmio. Posteriormente, o ensaio de PCR multiplex foi realizado utilizando primers para os genes Campylobacter (16S rRNA), C. jejuni (hipO) e C. coli (ceuE). Cinco protocolos foram testados, variando diferentes concentrações de MgCl2, tampão, concentração de DNA, temperatura de anelamento, concentração de gel de agarose e voltagem da corrida de eletroforese. A presença de Campylobacter spp. foi avaliada em 81 amostras de QMA de diferentes origens. O protocolo de PCR multiplex foi ajustado para as amostras artificialmente contaminadas. O limite de detecção foi estimado em 103 UFC/g. Campylobacter não foi encontrado em nenhuma dessas 81 amostras usando esse protocolo de PCR multiplex. No entanto, 29 (35,8%) dessas 81 amostras foram consideradas positivas, quando apenas os primers do gene 16S rRNA foram usados nas reações. O método padronizado é efetivo para detectar Campylobacter em amostras artificialmente contaminadas, mas não é robusto o suficiente para detecção em amostras de diferentes origens, provavelmente devido à complexidade da matriz desses queijos e baixo limite de detecção. Apesar disso, a presença de amostras positivas usando o primer 16S rRNA é um importante problema de saúde pública.
dc.format5 p.
dc.identifierIn: WORKSHOP DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA DA EMBRAPA GADO DE LEITE, 23., 2019, Juiz de Fora. Anais... Juiz de Fora: Embrapa Gado de Leite, 2019. (Embrapa Gado de Leite. Documentos, 234).
dc.identifierhttp://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1107057
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/123456789/442922
dc.languagepor
dc.rightsopenAccess
dc.subjectQueijo Minas Artesanal
dc.subjectPCR multiplex
dc.subjectCampylobacter
dc.titlePadronização de PCR Multiplex para detecção direta e diferenciação de espécies de Campylobacter em Queijo Minas Artesanal.
dc.typeArtigo em anais e proceedings

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