Comparación de metodologías para la purificación de proteínas de membrana externa de Brucella abortus

Vista sencilla de ítem
dc.audienceInvestigador
dc.audienceProfesional
dc.coverageCundinamarca
dc.coverageBogotá
dc.coverageColombia
dc.creatorForero de Lleras, Claudia
dc.creatorRueda de Clavijo, Esperanza
dc.creatorDeleón, Ligia S. de
dc.creatorMariño, Olga C.
dc.creatorMontes de Gómez, Virginia
dc.date2019-09-06T00:52:08Z
dc.date2019-09-06T00:52:08Z
dc.date1990
dc.date.accessioned2026-06-27T04:28:55Z
dc.descriptionLas proteínas de la membrana externa de la Brucella abortus, Cepa 19 y RB-51 se purificaron por dos métodos, el primero basado en la extracción secuencial por tratamientos sucesivos con detergentes y lisozima y el segundo, en la formación del saco de peptidoglican con sus proteínas asociadas, utilizando dodecil sulfato de so-dio (SOS) a 50°C y extracción directa de las proteínas de la membrana externa con 50 mM de MgCl2 en SDS-23 Mercaptoetanol a 37°. Se utilizó la sonicacion para lograr la ruptura bacterial y su efecto se comprobó por microscopia electrónica. Las proteínas obtenidas se caracterizaron por electroforesis en geles de poliacrilamida. El método de extracción por detergentes aniònicos débiles y dipolares y tratamiento con lisozima, comprobó ser superior en calidad, selectividad y concentración de las proteínas de interés. Los pesos moleculares obtenidos para las proteínas denominadas porinas van de 37 a 41 kilo Daltons (k0), asi mismo se detecta una proteína de bajo peso molecular (14kI3). Se detecto reacción especifica de las proteínas en sueros controles de bovinos con infección natural de B. abortus por to técnica de inmunotransferencia en papel de nitrocelulosa.
dc.descriptionOuter membrane proteins of Bruce/la abortus strain 19 and strain RB-51 were purified using two methods. One based on sequential detergent extraction plus iysosyme treatment and the other obtaining peptidoglican saculae associated proteins by sodium dodecil sulfate (SDS) treatment at 50°C, and external protein extraction with SDS-23 mercaptoetanol, 50 mM MgCl2 at 37°C. Sonication was used in order to disrupt the cells and its effect was monitored by electron microscopy. The proteins were characterized by polycrilamide gel electrophoresis. Detergent and lysozyme treatment demonstrated superiority over SDS extraction regarding selectivity, antigenicity and yield. The proteins obtained from strain RB-51 had less LPS contamination. The molecular weights of the porin proteins obtained ranged between 37 and 41 kD, and a 14 kD protein was also detected. Specific reaction of the purified proteins was detected by western-blotting with positive bovine control serums.
dc.descriptionGanado de leche
dc.descriptionGanadería leche
dc.formatapplication/pdf
dc.formatapplication/pdf
dc.identifier0018-8794
dc.identifierhttp://hdl.handle.net/20.500.12324/35399
dc.identifier17608
dc.identifierreponame:Biblioteca Digital Agropecuaria de Colombia
dc.identifierrepourl:https://repository.agrosavia.co
dc.identifierinstname:Corporación colombiana de investigación agropecuaria AGROSAVIA
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/123456789/29014
dc.languagespa
dc.publisherInstituto Colombiano Agropecuario - ICA
dc.relationRevista ICA
dc.relation3
dc.relation193
dc.relation202
dc.rightsAttribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International
dc.rightshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.rightsAcceso a texto completo
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.sourceRevista ICA; Vol. 25, Núm. 3 (1990): Revista ICA Julio-Septiembre);p. 193-202
dc.subjectGanadería - L01
dc.subjectVaca
dc.subjectMembranas celulares
dc.subjectBrucella abortus
dc.subjectGanadería y especies menores
dc.thumbnailhttps://repository.agrosavia.co/bitstreams/cd684724-829c-43fe-b13c-158e952efc25/download
dc.thumbnailhttps://repository.agrosavia.co/bitstreams/565afbf3-8f8f-43e1-9bf2-824bdd81c1a6/download
dc.titleComparación de metodologías para la purificación de proteínas de membrana externa de Brucella abortus
dc.typeArtículo científico

Archivos

Colecciones

Científico