Expresión heteróloga del gen phoC de Morganella morganii en Escherichia coli CC118 hpir
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Instituto Cubano de Investigaciones de los Derivados de la Caña de Azúcar
Resumen
Descripción
Las fosfatasas ácidas juegan un rol importante en la mineralización del fósforo de origen orgánico que está presente en el suelo. La transferencia de genes que codifican para estas enzimas, mediante ingeniería genética, es una vía para la obtención de cepas mejoradas en cuanto a la solubilización de fósforo. Se tuvo como objetivo el subclonaje del gen phoC de Morganella morganii en un vector para su integración estable en el cromosoma de bacterias promotoras del crecimiento de las plantas y su expresión en Escherichia coli CC118 pir. Se empleó un vector de acoplamiento, el pUC18NotI y posteriormente el vector de liberación suicida pJMT6 (derivado de pUT/mini Tn5), para construir el vector de integración que porta el gen que codifica para la fosfatasa ácida PhoC de Morganella morganii. La construcción recombinante fue transferida a Escherichia coli CC118 pir. Se analizó la expresión del gen phoC en la cepa transformada por medio de la cuantificación de la actividad fosfatasa ácida en el extracto celular y en el sobrenadante del cultivo, y se detectó un aumento significativo respecto a E.coli CC118 pir sin el plásmido recombinante, lo cual demostró la expresión del gen subclonado.
Palabras clave
Agrociencias