Edição de genoma via non-homologous end joining (NHEJ) e ribonucleoproteínas (RNP).
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Introdução. Mecanismos de reparo genético. Non-homologous end joining (NHEJ). Mecanismo bioquímico. Edição de Genomas via NHEJ - aplicações práticas. Modulação e otimização de promotores. Ribonucleoproteínas (RNPs) nuclease-sgRNA. Estratégias de delivery e internalização das RNPs. Procedimento prático - Parte 1: in silico: Identificação e seleção de alvos genômicos; Desenho de gRNA; Identificação de off-targets potenciais; Simulação de knockout e predição de homologia. Parte 2: in vitro: Eficiência de clivagem e validação do complexo nuclease-sgRNA. Parte 3: in vivo: Identificação de plantas editadas.
Cap. 2.
Cap. 2.
Palabras clave
CRISPR, Non-homologous, CRISPRevolution, Biotecnologia, Engenharia Genética, RNA, Genoma, DNA, Biotechnology, Genetic engineering, Plant genetics, RNA editing, Nucleases, Ribonucleoproteins