Marcadores moleculares do tipo SSR na confirmação de paternidade em genótipos de melancia.

SILVA, M. G. da; NASCIMENTO, T. L. do; MELO, N. F. de; DIAS, R. de C. S.; SOUZA, F. de F.

Marcadores moleculares do tipo SSR na confirmação de paternidade em genótipos de melancia.

Autores

Descripción

A melancia é uma fruta bastante apreciada devido ao sabor doce e às propriedades refrescantes e nutricionais. Acredita-se que o seu consumo pode ser ampliado com a oferta de novas cultivares desenvolvidas por meio de melhoramento genético. Neste sentido, marcadores moleculares podem ser uma importante ferramenta em várias fases em programas de melhoramento, incluindo a confirmação do cruzamento entre dois genitores. O objetivo deste trabalho foi confirmar a paternidade em genótipos de melancia usando marcadores moleculares do tipo microssatélites (Simple Sequence Reapets - SSR). Foram cruzados dois genótipos de melancia, contrastantes para várias características morfoagronômicas. Os DNAs genômicos dos genitores e do F1 foram extraídos utilizando-se o protocolo de Doyle-Doyle. Para as reações de PCR, foram utilizados 129 marcadores, com a programação: um ciclo inicial de 94 °C, 2 minutos, seguido de 30 ciclos de 94 °C, 15 segundos, 56 °C, 30 segundos, e 72 °C, durante 30 minutos. Os produtos das amplificações foram corridos, em cubas verticais, em géis de poliacrilamida, durante 3 horas a 45 w e, em seguida, foram revelados por meio de um protocolo que utiliza hidróxido de sódio e nitrato de prata. Os resultados foram interpretados como presença (1) ou ausência (0) de banda. Vinte marcadores foram polimórficos, representando 15,5% do total. A partir do padrão de amplificação desses marcadores, foi possível observar que os dois fragmentos polimórficos identificados nos genitores homozigotos apresentavam-se em heterozigose no híbrido, possibilitando uma correspondência direta da paternidade e, dessa forma, demonstrando a viabilidade do uso dos 20 microssatélites em programas de melhoramento genético de melancia.