Efeito do diluente na qualidade espermática após a preparação de sêmen bovino criopreservado para ser utilizado na produção in vitro de embriões.

CONCEIÇÃO, N. da F.; CARVALHO, J. de O.; PIVATO, I.; DODE, M. A. N.

Efeito do diluente na qualidade espermática após a preparação de sêmen bovino criopreservado para ser utilizado na produção in vitro de embriões.

Autores

Descripción

Este trabalho objetivou avaliar o efeito de dois diferentes diluentes na qualidade dos espermatozoides criopreservados, antes e após a passagem pelo gradiente de Percoll, e três horas após incubação em meio de fecundação (FEC) utilizado para a co-incubação de espermatozóides e ovócitos durante o processo de FIV. Ejaculados de quatro touros foram diluídos com Botu-Bov© ou com citrato-gema, sendo posteriormente criopreservados. Foi descongelada uma palheta de cada touro/tratamento e formado um pool, sendo realizadas análises em três momentos: pré e pós passagem em gradiente de Percoll, e três horas após a incubação em FEC. Em todos os momentos foram avaliados parâmetros de motilidade pelo CASA e integridade de membrana plasmática (IMP) por três métodos: coloração com eosina-nigrosina, coloração com iodeto de propídeo (IP) associado à diacetato de 6-carboxifluoresceína (CFDA) e teste hiposmótico (HOS). Os dados foram analisados por ANOVA (P≤0,05). Não foram observadas diferenças entre os parâmetros de motilidade avaliados para os dois diluentes, com exceção da amplitude lateral de cabeça (AHL), que foi maior no citrato-gema após 3 horas em FEC. Apesar do método utilizado para avaliar a IMP afetar a porcentagem de células íntegras detectadas, o uso de diferentes diluentes não influenciou esse parâmetro. Conclui-se que não há efeito dos diluentes utilizados neste estudo na qualidade espermática após a manipulação do sêmen para ser utilizado na PIV. Entretanto, estudos avaliando o desenvolvimento embrionário são necessários para confirmar que o diluente utilizado para criopreservar o sêmen não afeta os resultados da produção in vitro de embriões (PIV).