Caracterización  del  Gen  de  la Proteína  de  la  Cápside  de Dos Aislamientos  del  Virus  del  Mosaico del  Pepino  (CMV),  Obtenidos  de Plátano  y  Banano  (Muso  spp)

Helena    Reichel; Leonardo    Mariño; Jean    Kummert; Silvio    Belalcázar; Javier    Narváez

Caracterización del Gen de la Proteína de la Cápside de Dos Aislamientos del Virus del Mosaico del Pepino (CMV), Obtenidos de Plátano y Banano (Muso spp)

Autores

Editor

Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria

Descripción

EI presente estudio se adelantó dentro de un proyecto de investigación para obtención de plantas resistentes al virus del mosaico del pepino (CMV), mediante la transforma- ción y expresión del gen de la proteína de la cápside de CMV en plantas transgénicas de variedades comerciales de plátano y banano (Musa spp). Se trata de una estrategia reciente que ha sido utilizada con éxito en varios cultivos comerciales. El CMV fue de- tectado serológicamente (DAS-ELISA) en hojas de plátano cv. Dominico Hartón y de banano cv. Gros Michel que presentaban síntomas de mosaico. El virus se purificó par- cialmente a partir de hojas infectadas de Nicotiana tabacumy con la a1'uda del micros- copio electrónico de transmisión, se identiñcaron partículas isométricas de aproximadamente 30 nm de diámetro. El peso molecular de la proteína de la cápside en geles desnaturalizados de poliacrilamida (SDS-PAGE) fué de z8 kDa. El patrón electroforético del RNA viral de doble cadena (dcRNA) fué similar para los dos aisla- mientos de CMV obtenidos de plátano y banano. Utilizando la dcRNA como patrón, se sintetizó cADN por transcripción reversa y, a partir de éste, se amplificaron por PCR los genes de la proteína de la cápside (GPC) de ambos aislamientos. Los productos de la amplificación de aproximadamente 89o pares de bases (pb), que contenían el GPC, se clonaron en el plásmido vector Bluescript KS (+/-). El análisis de restricción con endonucleasas y la secuenciación del GPC de ambos aislamientos, indicó que éstos pertenecen al subgrupo I (tipificado por el aislamiento DTL). El análisis de la secuen- cia nucleotídica y de aminoácidos de ambos genes, indicó una homología del 99o/o y un alto grado de conservación con otros miembros del subgrupo I de CMV. El GPC se está clonando en plásmidos vectores para su transformación en variedades comercia- Ies de plátano y banano en Colombia.