Fundamentos teóricos-práticos e protocolos de extração e de amplificação de DNA por meio da técnica de reação em cadeia de polimerase.
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Caracterização molecular dos ácidos nucléicos; Obtenção de amostras para extração de dna; Cuidados durante e após a extração de dna; Material necessário para extração de dna; Extração de dna de amostras de tecidos de mamíferos; Material; Digestão da amostra; Extração do dna com fenol; Purificação do dna por meio de precipitação com etanol; Protocolos empregados na rotina de extração de dna de amostras de sangue; Extração de dna de amostras de sangue com a utilização de colunas de extração; Protocolo de extração de dna de sangue mediante precipitação com sal; Extração de dna de amostras congeladas de sangue; Protocolos empregados na extração de dna de amostras de artrópodes com utilização de colunas de purificação; Protocolo para extração de dna de amostras de carrapatos com colunas de purificação 11; Protocolo de extração de dna de ovos de carrapatos com a utilização de colunas de purificação; Extração de dna de amostras de sêmen; Extração de dna de plantas; Leitura da concentração de dna nas amostras Introdução à tecnica de pcr; Escolha dos primers ou iniciadores; Pcr "multiplex" ; Nested-pcr; Pcr quantitativa; Eletroforese de ácidos nucléicos; Eletroforese em gel de agarose; Variáveis que afetam a migração do dna através do gel de agarose; Protocolo para análise de produtos de amplificação e fragmentos de digestão em gel de agarose; Eletroforese em sistema capilar; Protocolo para análise de produtos de amplificação em sistema capilar; Protocolos de amplificação de dna parasitário; Pcr para babesia bigemina; Nested-pcr para babesia bigemina; Eletroforese em gel de agarose para visualização dos produtos amplificados.
Palabras clave
PCR, Técnicas, Cadeia de polimerase, Biologia Molecular, DNA