Eletroporação e biópsia embrionária: implicações para edição do gene da beta-lactoglobulina em embriões bovinos.
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A eletroporação do sistema CRISPR/Cas9 em zigotos é uma ferramenta promissora para a edição genômica em bovinos. Paralelamente, a biópsia embrionária permite a avaliação genômica pré-implantacional e pode ser aplicada para seleção de embriões geneticamente editados. Este estudo investigou os efeitos da eletroporação de zigotos bovinos com CRISPR/Cas9 para edição do gene da beta-lactoglobulina sobre a viabilidade embrionária pós-biópsia, avaliada pela capacidade de reexpansão da blastocele, e a qualidade das análises genéticas subsequentes. A taxa de reexpansão da blastocele foi semelhante (p>0,05) entre o grupo controle (80%) e eletroporado (62,8%). Amostras de biópsias do grupo controle não apresentaram falhas da amplificação por PCR, enquanto 21,7% das amostras falharam no eletroporado, porém sem diferenças entre os grupos (p>0,05). Não houve diferenças (p>0,05) nas concentrações de DNA nas amostras entre grupos controle (6,09 ± 1,01 ng/µL) e eletroporado (4,9 ± 0,5 ng/µL), e na qualidade dos cromatogramas. Os resultados indicam que a eletroporação não compromete a viabilidade embrionária pós-biópsia e nem interfere negativamente na amplificação por PCR ou na qualidade do sequenciamento, evidenciando sua viabilidade para aplicações de edição do gene da beta-lactoglobulina. As informações geradas no presente estudo vão ao encontro dos Objetivos do Desenvolvimento Sustentável (ODS) contidos na Agenda 2030, proposta pela Organização das Nações Unidas, da qual o Brasil é signatário, sobretudo nos seguintes objetivos específicos: ODS 2 - Erradicação da fome: Acabar com a fome, alcançar a segurança alimentar e melhoria da nutrição e promover a agricultura sustentável.
ODS 2.
ODS 2.
Palabras clave
CRISPR/Cas9, Edição gênica, Diagnóstico pré-implantacional, Bovino, Melhoramento Animal