Uso de la reacción en cadena de la polimerasa para caracterizar aislamientos nativos de Bacillus thurigiensis.

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dc.coverageColombia
dc.creatorMariño Ramírez, Leonardo
dc.creatorOrozco Cárdenas, Martha L.
dc.creatorNarváez Vásquez, Javier
dc.creatorHernández Fernández, Javier
dc.date2018-09-11T19:33:15Z
dc.date2018-09-11T19:33:15Z
dc.date1997
dc.date.accessioned2026-06-27T04:37:18Z
dc.descriptionEn este estudio se estandarizó una metodología para la caracterización molecular de cepas nativas de Bacillus thurigiensis, la cual se basó en la aplificación de los genes cry mediante la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR). Se utilizarón 4 mezclas de oligonucleótidos: 2 generales (I y II), los cuales reconocen genes de las familias cry1, cry2, cry3, cry4 y cryIa, y 2 específicos (A y B), que identifican los genes de la familia cry1 (cry1Aa, cry1Ab, cryAc, cry1Ba, cry1Ca y cry1Da). La calidad y concentración del ADN bacteriano influyó sobre la especificidad y concentración de los productos obtenidos mediante la amplificación de los genes cry. La calidad del ADN purificado através del método rápido reportado por M. He et al. (Nucleic Ac. Res: 18:1660, 1990) permitió una amplificación eficiente. Para realizar la PCR en condicones óptimas, se utilizó una mezcla de reacción con un volumen final de 20 uL, la cual contenia 0,4 uM de cada oligonucleótido, 1X PCR buffer (50 mM KCL, 10mM Tris-HCL, pH 8,3 y 3,0 mM MgCl2), 200 uM de cada dNTP y 1U de Taq-ADN-polimerasa, ademas de 10-100 300-500 ng de ADN bacterial para las mezclas de los oligonucleotidos Generales y Específicos, respectivamente. El programa de amplificación incluyó 30 ciclos de desnaturalización a 94 grados centígrados, hibridación a 53 grados centígrados y síntesis a 72 grados centígrados durante 20 segundos cada uno. La metodología estandarizada se puede utilizar rutinariamente para amplificar los genes cry procedentes de aislamientos nativos de B. thurigiensis, lo cual permite clasificarlos y seleccionarlos de una manera rápida y precisa de acuerdo con su actividad biológica y potencial biotecnológico, adicionalmente, como paso previo de los ensayos de toxicidad contra diversas especies de insectos plaga de interés agrícola
dc.formatapplication/pdf
dc.formatapplication/pdf
dc.identifierhttp://hdl.handle.net/20.500.12324/16438
dc.identifier25645
dc.identifierreponame:Biblioteca Digital Agropecuaria de Colombia
dc.identifierrepourl:https://repository.agrosavia.co
dc.identifierinstname:Corporación colombiana de investigación agropecuaria AGROSAVIA
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/123456789/33321
dc.languagespa
dc.publisher‎‎Corporación colombiana de investigación agropecuaria - AGROSAVIA
dc.relationRevista CORPOICA
dc.relation1
dc.relation9
dc.rightsAttribution-NonCommercial-ShareAlike 4.0 International
dc.rightshttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/
dc.rightsAcceso a texto completo
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.subjectGenética vegetal y fitomejoramiento - F30
dc.subjectEnfermedades de las plantas - H20
dc.subjectBacillus thurigiensis
dc.subjectPcr
dc.subjectReservas genéticas
dc.subjectOrganismos indígnenos
dc.subjectEndotoxinas
dc.subjectGenes
dc.subjectNucleótidos
dc.subjectTransversal
dc.thumbnailhttps://repository.agrosavia.co/bitstreams/33aa5eb7-06ab-444e-85cc-811274be07c5/download
dc.titleUso de la reacción en cadena de la polimerasa para caracterizar aislamientos nativos de Bacillus thurigiensis.
dc.typeArtículo científico

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