Cinética de la actividad de las celulasas microbianas en el líquido de rumen
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Instituto de Ciencia Animal
Resumen
Descripción
Para determinar la cinética de las enzimas celulasas producidas por el pool de microorganismos celulolíticos en el líquido de rumen filtrado (LRF), se efectuaron dos experimentos mediante diseño en bloques al azar, con cinco réplicas y tres repeticiones. Los indicadores cinéticos que se estudiaron fueron: a) velocidad inicial de la reacción enzimática (a los tiempos 0.25, 0.5, 0.75, 1.0 y 2.0 h) y concentración de enzimas en el líquido ruminal puro y diluido (1:2, 1:3, 1:4, 1:5 y 1:6). En el primer estudio, la velocidad inicial mostró una relación polinomial entre el tiempo y el producto formado, y la ecuación que relaciona ambos factores es y = -0.0634x2 + 0.2377x - 0.0094, R2 = 0.99. La actividad enzimática y la enzimática específica seredujeron a partir de las 0.75 h de incubación. En el segundo ensayo se demostró que la mayor actividad celulolítica específica se encontró a concentraciones de proteína de 1.52, 1.99 y 2.76 mg/mL, equivalentes a diluir el líquido de rumen, a razón de 1:4, 1:3 y 1:2, respectivamente. El valor más alto de actividad fue de 169.5 U/mg, cuando el líquido ruminal se diluyó a razón de 1:4. El menor valor de actividad específica se encontró cuando se utilizó el líquido de rumen sin diluir (96.14 U/mg de actividad, a una concentración de proteína de 5.194 mg/mL). La concentración de enzimas y su actividad mostraron una relación lineal y laecuación que la representa es: y = 42.729x + 207.27, R2 = 0.96. Se concluye que 0.25 h de incubación y una dilución del LRF de 1:4 son los rangos de tiempo y concentración de enzima en los que se produjo una mayor actividad de las enzimas celulasas.
Palabras clave
Agrociencias